無血清細胞凍存液不含動物血清成分,能夠減少細胞受到污染的風險,提高細胞凍存的安全性,能夠有效保護細胞在凍存過程中的存活率,減少凍存損傷,確保細胞復蘇后的活性和功能,適用于各種動物及人的細胞系和原代細胞。
無血清細胞凍存液的測定步驟:
-選擇處于對數生長期的細胞,用相應的培養基將細胞懸浮起來。
-進行細胞計數,確保細胞數量足夠。
-將細胞懸液轉移至離心管中,離心(通常800rpm,2分鐘)以去除上清液。
-加入適量的無血清培養基或PBS緩沖液,重懸細胞沉淀,再次離心洗滌,以去除殘留的培養基和血清成分。
-根據細胞數量,加入適量的無血清細胞凍存液,輕輕吹打混勻,使細胞與凍存液充分接觸。
-將含有細胞的凍存液分裝至凍存管中,每管體積適中(如500μl-1000μl),并做好標記。
-將凍存管放入-80°C冰箱中保存,約24小時后可轉入液氮罐中長期保存。
無血清細胞凍存液的使用注意事項:
-不同的細胞類型可能對凍存液的成分有不同的要求,因此應選擇適合目標細胞類型的。
-凍存液的濃度對凍存效果有重要影響,應嚴格按照產品說明書或實驗方案的要求進行配制和使用。
-在操作過程中,應嚴格遵守無菌操作規范,防止微生物污染。
-使用的凍存管、離心管等耗材應經過嚴格消毒處理。
-凍存時應控制好降溫速度,避免過快或過慢降溫導致細胞損傷。
-一般來說,先將凍存管放入-80°C冰箱中預冷一段時間(如24小時),然后再轉入液氮罐中長期保存。
-在凍存管上標記好細胞名稱、凍存日期等信息,以便后續查找和使用。
-凍存液中可能含有對細胞有毒的成分(如DMSO),在操作過程中應注意個人防護和環境保護。
-避免凍存液接觸皮膚和眼睛,如不慎接觸應立即用清水沖洗并就醫。