牛轉鐵蛋白為無血清培養基必需添加物組分,通過與轉鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TfR) 相互作用,在無血清細胞培養過程中發揮重要功能。
轉鐵蛋白能與三價鐵離子可逆性結合,調節鐵離子轉運及代謝,維持細胞內的鐵平衡。
我們對轉鐵蛋白的轉鐵作用都很了解,但其實它重要的意義在于維持細胞的生長和增殖,也就是說它有類似于生長因子的功能。
而且,轉鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細胞外環境中自由基的產生,防止細胞受到傷害。
牛轉鐵蛋白是血漿中主要的鐵傳遞蛋白,為細胞內化和細胞代謝提供所需的鐵。研究發現所有的細胞生長都離不開轉鐵蛋白。
不但維持正常的細胞代謝依賴于以生物活性形態存在的鐵,鐵還是一些酶的輔助因子,比如RNA聚合酶,DNA合成酶。同時也是血紅蛋白的重要組成部分。
轉鐵蛋白是血漿糖蛋白,從血漿中分離而來,牛轉鐵蛋白以兩種分子形態存在,即分子量分別為74KD和78KD。
每個轉鐵蛋白分子通過C端和N端結構位點可以結合兩分子鐵離子,所以轉鐵蛋白以三種形態存在:脫鐵(不結合鐵離子),飽和鐵(結合兩分子鐵離子)和部分飽和,在生理情況下,轉鐵蛋白分子僅有1/3被鐵飽和。
轉鐵蛋白對于絕大部分細胞系在無血清培養基中生長是必需的,研究表明飽和鐵形態的轉鐵蛋白對于促進細胞生長是有效的形態。對于雜交瘤,黏連細胞和懸浮細胞系,在細胞培養過程中,應保持培養基中轉鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針對不同的細胞系,需要選擇合適的濃度。
保存溫度(Storage Temperature):
轉鐵蛋白凍干粉需要保存在冷藏狀態下,使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合適的溶劑在室溫下將轉鐵蛋白凍干粉溶解成儲液,濃度在0.5-2.0mg/ml,然后用無菌濾膜進行過濾,濾液可在無菌條件下2-8℃保存30天,長期保存請分裝后存放于-80℃。